文章目录

1 材料与方法

1.1 实验材料

    1.1.1 主要试剂

    1.1.2 主要仪器

1.2 细胞培养

1.3 EMT模型构建及分组

1.4 MTT法检测细胞增殖

1.5 划痕实验法检测细胞迁移

1.6 蛋白质免疫印迹法检测上皮分子标志蛋白和间质细胞分子标志蛋白表达

1.7 上皮跨膜细胞电阻仪检测跨细胞电阻（tran-scellular resistance,TER）值

1.8 统计学处理

2 结果

2.1 EGCG对HPMCs增殖的影响

2.2 EGCG对HPMCs迁移的影响

2.3 EGCG对HPMCs上皮细胞分子标志蛋白表达的影响

2.4 EGCG对HPMCs间质细胞分子标志蛋白表达的影响

2.5 EGCG对HPMCs TER的影响

3 讨论

文章摘要:目的探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate, EGCG）对腹膜透析（peritoneal dialysis,PD）患者腹膜纤维化的防治作用及其机制。方法培养人腹膜间皮细胞（human peritoneal mesothelial cells, HPMCs）,分别以0、12.5、25、50、100μmol/L的EGCG对HPMCs进行预处理后,采用晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products, AGEs）诱导建立上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）模型,将未做任何处理的细胞作为对照组。采用MTT法分析EGCG对HPMCs增殖的影响;划痕实验法分析EGCG对HPMCs迁移的影响;蛋白质免疫印迹法检测HPMCs上皮细胞分子标志蛋白（Snail、E-cadherin、CK、ZO-1）和间质细胞分子标志蛋白（α-SMA、FSP1）表达水平;上皮跨膜细胞电阻仪检测EGCG对HPMCs跨细胞电阻（transcellular resistance, TER）的影响。结果与对照组比较,EMT模型组的细胞活力明显增加,Snail、E-cadherin、CK和ZO-1蛋白表达水平降低,α-SMA和FSP1蛋白表达水平升高,TER值增加（P<0.05）;EGCG可以剂量依赖性地减少HPMCs细胞活力,抑制HPMCs细胞迁移,增加Snail、E-cadherin、CK和ZO-1蛋白表达水平,减少α-SMA和FSP1蛋白表达水平,降低TER值（P<0.05）。结论 EGCG可有效抑制HPMCs增殖和迁移,并通过上调上皮细胞分子标志蛋白表达,下调间质细胞分子标志蛋白表达,增加HPMCs通透性,抑制HPMCs的EMT,延缓腹膜纤维化,具有临床应用价值。

文章关键词:

论文分类号:R285

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